Les levures sont des organismes unicellulaires. La plus utilisée et la plus connue est la levure Saccharomyces Cerevisicae.

 

Avantages:

  • non pathogène.
  • petit génome (16 chromosome linéaires avec télomères et centromère).
  • contiennent le plasmide 2µ (ADN double brin)

 

Transfection(les plus utilisés):

Les plasmides tranfectés sont en principe tout d'abord construit au sein de bactéries.Différents types de plasmides peuvent être construit:

  • YIP (Yeast Integrating Plasmid): surtout utilisé en recherche fondamentale.
  • YRP (Yeast Replicating Plasmid): possède des séquences ARS qui permettent au plasmide de se répliquer de manière autonome. Mais ceux ci sont peu stables et présents à un faible nombres de copies.
  • YAC (Yeast Artificial Chromosome): véritable petit chromosome avec séquences télomériques.
  • YEP (Yeast Episomal plasmid): se répliquent, avantage: bonne distribution dans toutes les cellules filles.
  • Lithium
  • Sphéroplastes
  • Electroporation
(voir PRO Méthodes)
Le gros avantage des levures, par rapport au système procaryote, est la présence de modifications post traductionnelles. Nous retrouvons notamment les ponts disulfures. Les glycosylations ont lieu mais sont généralement moins riche que dans les cellules de mammifères. De plus il peut de produire des hyperglycosylations qui risque d'être immunogène chez l'homme et de modifier la conformité de la protéine.
Nouveauté: utilisation d'une levure méthylotrophique: Pichia pastoris.
Celle-ci présente l'avantage de pouvoir utiliser le promoteur de l'alcool oxydase 1. Ainsi le fait de mettre du méthanol dans le milieu l'expression du gène d'intérêt.